1.2試驗方法

1.2.1菌懸液制備將大腸桿菌傳代培養,取第3代營(yíng)養瓊脂培養基斜面新鮮培養物,用5 ml滅菌生理鹽水將菌苔洗下,充分混混后制備成試驗濃度的菌懸液。

1.2.2檢樣制備用滅菌生理鹽水將實(shí)驗菌液稀釋

至103 ~103 cfu/ ml不同含菌量的菌懸液,以常規活菌計數法測定含菌量。將各紙巾檢樣分為A、B組，每種每組3份,在每份檢樣中滴染不同濃度菌懸液l ml,在無(wú)菌室內自然晾干,備用。

1.2.3檢測方法①生理鹽水稀釋法:將B組染菌檢樣剪碎后加入到200 ml滅菌生理鹽水中,充分混勻,制備成生理鹽水樣液。取樣液1 ml接種無(wú)菌平皿,倒人冷卻至45℃的熔化的營(yíng)養瓊脂培養基15~20 ml混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉平皿置37℃培養48 h,觀(guān)察結果,計數平板菌落數并計算出細菌總數。均質(zhì)器處理法:將A組染菌檢樣剪碎后加入到200 ml 滅菌生理鹽水中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1 ~2 min,制備成生理鹽水樣液。按上述方法接種培養。③結果計算:要求每個(gè)平板上菌落數在30~300 cfu/平板之間,按以下公式計算結果:細菌總數=平板菌落數×稀釋度。